一種高效提取焦化廢水活性污泥總DNA的方法
更新時間：2010-04-15 15:47
來源：環(huán)境科學學報
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摘要：對焦化廢水活性污泥中微生物建立高質(zhì)量的總DNA提取方法是開展分子生態(tài)學研究的重要前提.通過反復凍融-蛋白酶K-SDS、溶菌酶-反復凍融-SDS及溶菌酶-反復凍融-蛋白酶K-SDS這3種綜合方法對焦化廢水活性污泥總DNA進行提取，以OD260/OD280、OD260/OD230、產(chǎn)率、片段完整性、片段大小5個指標來評價樣品總DNA的提取效果.結(jié)果表明，溶菌酶-反復凍融-蛋白酶K-SDS法所提取的總DNA的OD260/OD280值約為 1.8，產(chǎn)率為1.90～16.30 μg·g-1，片斷完整性好，主帶清晰，大小約為23 kb，其PCR反應抑制物少，能夠直接進行16S rRNA基因的PCR擴增.溶菌酶-反復凍融-蛋白酶K-SDS法能夠為焦化廢水活性污泥中微生物的分子生態(tài)學研究提供高質(zhì)量的總DNA.
關鍵詞：焦化廢水 活性污泥 DNA提取 PCR擴增
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